全自動熒光細胞分析儀是一款基于圖像法檢測,配合多熒光通道,通過采集圖像中的細胞信息,進行定量分析。它將熒光顯微成像與統計學群體分析結合于一身,既能提供細胞群的統計數據,又可以獲得單個細胞的圖像,從而提供細胞形態學信息。*的圖像采集系統同時產生明場以及四張熒光圖像,讓實驗結果更為直觀。
全自動熒光細胞分析儀的應用舉例:
(一).在脂肪干細胞研究中的應用
1.細胞濃度、活率計數
全自動熒光細胞分析儀可同時進行臺盼藍及AOPI兩種方法計數,確保不同狀態的脂肪干細胞計數結果準確性。對于狀態差的樣本,臺盼藍計數的細胞圖片中,出現許多臺盼藍染色非常淺的類似空泡狀的細胞,這些細胞對樣本死活的判斷常常會比較主觀、容易誤判。
AOPI方法可以很好解決這個問題。所以建議對于不同狀態的的樣本可根據需求采用兩種方法計數結果正準確。
2.脂肪干細胞細胞表型鑒定
細胞密度、生長代數10代以內生物學特性基本保持不變,3代以上細胞表型標志物表達量下降,所以脂肪干細胞表型鑒定是非常重要的。主要包括細胞形態及CD分子標志物的鑒定。
對于脂肪干細胞表型鑒定,全自動熒光細胞分析儀不僅可以為大家提供清晰可靠的細胞圖片,同時可以結合FCSexpress類流式分析軟件得到可靠的類流式數據分析,從而滿足大家的需求。
(二).在免疫治療領域的應用
免疫療法,如CAR-T治療包括從病人收集外周血單核細胞(PBMC),然后分離所需的T細胞亞群,通過基因改造產生工程CAR-T細胞,CAR-T細胞在體外大規模擴增后再回輸到患者。全自動熒光細胞分析儀系統可以對整個CAR-T生產過程中細胞濃度,活率進行監測,并且符合GMP的要求。
1.AO/PI雙熒光法檢測活率:
吖啶橙和碘化丙啶是可以和細胞核核酸結合的熒光染料。AO可以穿透活細胞和死細胞對細胞核進行染色并發出綠色熒光,PI進入死細胞對細胞和進行染色并發出紅色熒光。
因此AO/PI為細胞核染料,可以準確區分活細胞與死細胞,而且可以排除雜質或者非特異細胞的干擾,進行精準的濃度活率檢測。
2.細胞毒性檢測
對靶標細胞用無毒的無放射性的鈣黃綠素進行標記(或者GFP轉染標記),我們可以觀察CAR-T細胞對腫瘤細胞殺傷效應。活的腫瘤細胞會含有鈣黃綠素或者GFP,死的腫瘤細胞不含有鈣黃綠素或者GFP。
Hoechst33342被用來染色所有的細胞(包含T細胞和腫瘤細胞),PI用來染色所有的死細胞(包含T細胞和腫瘤細胞)。這種染色策略可以讓我們對細胞進行精準的區分。